Силикагель и его применение в высокоэффективной жидкостной хроматографии

Курсовой проект - Химия

Другие курсовые по предмету Химия

Скачать Бесплатно!
Для того чтобы скачать эту работу.
1. Пожалуйста введите слова с картинки:

2. И нажмите на эту кнопку.
закрыть



емых пределах.

 

2.3 Аппаратурное оформление эксперимента

 

В современной жидкостной хроматографии используют приборы различной степени сложности от наиболее простых систем, до хроматографов высокого класса, снабженных различными дополнительными устройствами.

На рис.2.4 представлена блок-схема жидкостного хроматографа, содержащая минимально необходимый набор составных частей, в том или ином виде присутствующих в любой хроматографической системе.

 

Рисунок 2.4. Блок-схема жидкостного хроматографа: 1 сосуд для подвижной фазы; 2 насос; 3 инжектор; 4 колонка; 5 термостат; 6 детектор; 7 регистрирующая система

 

В качестве сосудов для подвижной фазы (1) чаще всего используют стеклянные бутылки вместимостью 0,71л. Большое значение имеет тщательная дегазация подвижной фазы. Предпочтительнее выполнять эту операцию непосредственно в рассматриваемом сосуде, чтобы исключить переливание растворителя.

Современные насосы (2) для жидкостной хроматографии представляют собой прецизионные устройства, обеспечивающие постоянную подачу растворителя в колонку и способные создавать давления до нескольких десятков МПа. Конструкция насоса определяется, прежде всего, рабочим давлением в системе.

Инжекторы (3) обеспечивают ввод проб от 0,1 мкл до нескольких миллилитров с высокой воспроизводимостью при давлениях до 3050 МПа. Инжекторы должны работать при повышенных температурах и в среде активных растворителей и реагентов.

Колонки (4) для ВЭЖХ представляют собой толстостенные трубки из нержавеющей стали длиной 10, 15, 25см с внутренним диаметром 45,5мм, способные выдержать высокое давление. Большую роль играет плотность и равномерность набивки колонки сорбентом. Постоянство температуры обеспечивается термостатом.

Повышение температуры разделения улучшает эффективность колонок в ОФВЭЖХ. Стабилизация температуры также повышает точность количественных определений, поэтому использование термостатов (5) весьма желательно, а иногда обязательно. В ВЭЖХ чаще всего применяют воздушные термостаты с интенсивным перемешиванием воздуха, в которых расположены теплообменник для подогрева растворителя, дозатор и колонки.

Детекторы (6) для жидкостной хроматографии имеют проточную кювету, в которой происходит непрерывное измерение какого-либо свойства протекающего элюента. Наиболее популярными типами детекторов общего назначения являются дифференциальные рефрактометры, измеряющие показатель преломления системы пробаэлюент, и спектрофотометрические детекторы, определяющие оптическую плотность растворителя на фиксированной длине волны (как правило, в ультрафиолетовой области УФ-детекторы).

Регистрирующая система (7) в простейшем случае состоит из дифференциального усилителя и самописца. В сложных хроматографических системах используется блок интерфейса, соединяющий хроматограф с персональным компьютером, который осуществляет не только сбор и обработку информации, но и управляет прибором.

 

2.4 Методика проведения эксперимента

 

В экспериментальной части курсовой работы была поставлена задача подобрать опытным путем хроматографическую колонку на основе химически модифицированного силикагеля для методики количественного определения эналаприла малеата, а также сравнить эффективность хроматографического разделения в зависимости от используемого сорбента.

Структурная формула эналаприла приведена на рис.2.5 [20].

 

Рисунок 2.5. Структурная формула эналаприла

 

Субстанция эналаприла малеата представляет собой белый кристаллический порошок, плохо растворимый в воде, растворимый в этаноле и метаноле. Эналаприла малеат является биологически активным веществом, применяемым в качестве лекарственного средства для лечения артериальных гипертензий и застойной сердечной недостаточности, а также в комплексной терапии инфаркта миокарда.

Оборудование:

  1. весы аналитические электронные Mettler Toledo AG204;
  2. ультразвуковой очиститель Elma T710DH;
  3. жидкостной хроматограф Agilent 1100, соединенный с персональным компьютером.

Материалы:

  1. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем цианосилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Waters RP-CN;
  2. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем цианосилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Zorbax XDB-CN;
  3. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм WatersSymmetry C18;
  4. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем октасилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм WatersSymmetry C8;
  5. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем октасилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм ZorbaxSBC8;
  6. колонка размером 4,6х250мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм ZorbaxSBC18;
  7. колонка размером 4,6х150мм, заполненная циркония оксидом для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Discovery ZR-РBD;
  8. мерная колба вместимостью 25 мл;
  9. микропипетка автоматическая 100250 мкл.

Реактивы:

  1. ацетонитрил для хроматографии CH3CN [19];
  2. вода для хроматографии [19];
  3. дикалия гидрофосфат K2HPO4 [19];
  4. кислота фосфорная концентрированная H3PO4 [19];
  5. субстанция эналаприла малеата C20H28N2O5C4H4O4.

Методика [21]:

Испытуемый раствор. Близко 100 мг (точная навеска) субстанци

s