Атф индуцированное изменение внутриклеточной концентрации кальция в нейронах неокортекса крыс

  СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ A.Shmigol, A.Verkhratsky & G. Isenberg (1995): Calcium-induced calcium release in rat sensory neurones. Journal of Physiology (London), 489.3 627-636. A.Shmigol,

Атф индуцированное изменение внутриклеточной концентрации кальция в нейронах неокортекса крыс

Информация

Биология

Другие материалы по предмету

Биология

Сдать работу со 100% гаранией
i>

 

  1. Сурамин, известный антагонист Р2 типа пуринорецепторов, уменьшал [Ca2+]i транзиенты, вызванные приложением 100 мкМ АТФ на 76% 7% и также не изменял концентрацию [Ca2+]i в покое. Данные представлены на рисунке 14.

 

 

  1. ОБСУЖДЕНИЕ

При исследовании средних слоев неокортекса крыс мы обнаружили их способность отвечать на приложение АТФ. Таким образом мы можем сделать вывод о наличии в данном объекте пуринорецепторов. Ответ на АТФ является доза-зависимым с амплитудой половинного ответа в 220 нМ. Последовательные приложения АТФ, после второго приложения, не вызывали уменьшения амплитуды [Ca2+]in транзиентов. Из этого можно сделать вывод об отсутствии десенситизации данного типа рецепторов.

Исследуя источники повышения цитозольного кальция мы обнаружили, что АТФ активирует как ионотропные так и метаботропные рецепторы. Блокаторы потенциал - управляемых кальциевых каналов такие как кадмий, никель и верапамил уменьшали АТФ - индуцированные кальциевые транзиенты на 35% - 15%, что говорит об опосредованном АТФ активировании потенциал - управляемых каналов.

Для исследования активацию метаботропных рецепторов. Для этого мы прилагали АТФ в бескальциевом растворе, - амплитуда ответа при этом уменьшалась на 45% 7%. Этот результат говорит о том, что внутриклеточные депо принимают участие в генерации [Ca2+]in ответов, причем их вклад близок к половине. При повторных аппликациях АТФ в бескальциевом растворе Ca2+ ответ исчезал полностью после второй аппликации, т.е. внутриклеточные депо полностью истощаются. Исследуя путь высвобождения внутриклеточного кальция мы апплицировали тапсигаргин - спецефический блокатор АТФ - азы эндоплазматического ретикулума. [Ca2+]in транзиенты уменьшались на 63% 5% в присутствии тапсигаргина. Аппликация коффеина, агониста рианодиновых рецепторов, в клетках моторной коры 14 дневных крыс не вызывали повышения уровня [Ca2+]in . Следовательно выброс [Ca2+]in из внутриклеточного депо происходит по IP3 - чувствительному механизму.

В дальнейшем мы исследовали более подробно типы присутствующих пуринорецепторов. Построив ряд активности агонистов для Р1 и Р2 пуринорецепторов по амплитудам ответов, мы сделали заключение базирующееся на отсутствии ответа на аденозин, что в нашем объекте присутствуют только Р2 пуринорецепторы. Проводя дальнейшую субклассификацию Р2 типа рецепторов мы использовали сурамин - блокатор некоторых типов Р2х и Р2у рецепторов. Приложение сурамина уменьшало амплитуду [Ca2+]i транзинета вызванного приложением 100 мкМ АТФ на 76% 5%, что говорит о наличии этих типов рецепторов в исследуемом объекте.

 

  1. ВЫВОДЫ
  2. Приложение АТФ в различных концентрациях вызывает Ca2+ транзиенты в клетках моторной коры крыс.
  3. Ответ на АТФ является доза-зависимым с амплитудой половинного ответа в 220 нМ.
  4. АТФ активирует как ионотропный так и метаботропные пути повышения внутриклеточного кальция.
  5. В генерации АТФ индуцированного повышения [Ca2+]in принимают участие некоторые типы потенциал - управляемых кальциевых каналов.
  6. Высвобождение внутриклеточного кальция происходит из IP3 чувствительных депо.
  7. В данном объекте присутсвуют только Р2 подтипы пуринорецепторов.
  8. Сурамин - антагонист Р2Х2 и Р2Х5 и Р2У рецепторов уменьшает амплитуду [Ca2+]in транзиенты, что говорит присутствии некоторых из вышеперечисленных рецепторов.

 

  1. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
  2. A.Shmigol, A.Verkhratsky & G. Isenberg (1995): Calcium-induced calcium release in rat sensory neurones. Journal of Physiology (London), 489.3 627-636.
  3. A.Shmigol, G. Isenberg, P.Kostyuk & A. Verkhratsky (1994): Calcium-induced Ca2+ release from internal stores in rat dorsal root ganglion neurones. In: European Journal of Neuroscience, Suppl. 7, Proceedings of the 16th Annual ENA Meeting, p. 146.
  4. A.Shmigol, N.Svichar, P.Kostyuk & A.Verkharatsky. (1995): “Incremental” caffeine-induced calcium release in mouse sensory neurones. European Joutnal of Neuroscience, Supple № 8. p111. Proceedings of the 16th Annual ENA Meeting.
  5. A.Shmigol, Yu.Usachev, N.Pronchuk, S.Kirischuk, P.Kostyuk & A.Verkhratsky (1994): Properties of the caffeine sensitive intracellular calcium stores in mammalian neurons. Neurophysiology /Neirophiziologia, v. 26 No. 2, p. 16 - 25.
  6. A.Verkhratsky, A. Shmigol, S. Kirischuk, N. Pronchuk & P. Kostyuk (1994): Age-dependent changes in calcium currents and calcium homeostasis in mammalian neurons. Annals of the New York Academy of Sciences, v. 747, p365 - 381.
  7. Abbracchio, M. P., Burnstock, G. (1994) Purinoceptors: are there families of P2x and P 2y purinoceptors? Pharmac. Ther. 64: 445-475
  8. Anatoly Smigol, Platon Kostyuk, Alexey Verhratsky (1994) Role of caffeine-sensitive Ca2+ stores in Ca2+ signal termination in adult DRG neurones // NeuroReport v.5, 2073-2076.
  9. Anatoly Smigol, Sergey Kirischuk, Platon Kostyuk, Alexey Verhratsky (1994) Different properties of caffeine-sensitive Ca2+ stores in peripherial and central mammalian neurones // Pflugers Arch v.426, 174-176.
  10. Baker P. F., Blaustein M.P., Hodgkin A.L. and Steinhardt R. A. (1969) The influence of calcium on sodium efflux in squid axons. J. Physiol., Lond. 200, 431458.
  11. Bean B.P. (1992) Pharmacology and electrophysiology of ATPactivated ion channels. Trends Pharmacol. Sci. 13, 87 90.
  12. Belan P., Kostyuk P., Snitsarev V. and Tepikin A. (1993) Calcium clamp in isolated neurones of the snail Helix pomatia. J. Physiol., Lond. 462, 47 58.
  13. Bronner, F. (1990). Intracellular Ca2+ regulation.. New York: WileyLiss.
  14. Burk S. E., Lytton J. , MacLennan D. H. and Shull G. E. (1989). cDNA cloning, functional expressing, and mRNA tissue distribution of a third organellar Ca2+ pump. J. Biol. Chem. 164, 1856118568.
  15. Burnstock, G. (1972) Purinergic nerves. Pharmacol. Rev. 24: 509-581
  16. Burnstock, G. (1978) A basis for distinguishing two types of purinergic receptor. in: book
  17. Burnstock, G. (1990) Co-transmission. Arch. Int. Pharmacodyn. 304: 7-33
  18. Burnstock, G., Kennedy, C.(1985) Is there a basis for distinguishing two types of P2 purinoceptor? Gen.Pharmacol. 16: 433-440
  19. Carafoli E. (1992) Calcium pump of the plasma membrane. Physiol. Rev. 71, 129 153.
  20. Chen, C.-C., Akopian, A.N. et al, (1995) A P2x purinoceptors expressed by a sybset of sensory neurones. Nature 377: 428 - 431
  21. Кришталь О.А., Марченко С.М. (1983). Рецепторы АТФ в сенсорных нейронах млекопитающих. Докл. Акад. Наук УССР.
  22. Gianini G., Clementi E., Ceci R., Marziali G., and Sorremtino V. (1992) Expression of a ryanodine receptor Ca2+ that is regulated by TGFb, Science, 257, 91 94.
  23. Ginetta Collo et al, (1996) Cloning of P2X5 andP2X6 receptors and the distribution and properties of an extended family of ATP-gated ion channels. The J. of Neurosci. 16(8): 2495-2507
  24. Gordon, J. L. (1986) Extracellular ATP: effects, sources and fate. Biochem.J. 233: 309-319
  25. Grynkiewicz, G., Poenie, M., and Tsien, R.Y. A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescent properties. J. Biol. Chem., 260, 3440-3450, 1985.
  26. Heizmann C.W. and Hunziker W. (1991) Intracellular calciumbinding proteins: more sights than insights. Trends Biochem. Sci. 16, 98 103.
  27. Heschler J. and Schultz G. (1993) Gproteins involved in the calcium channel signalling system. Curr. Opin. Neurobiol. 3, 360367.
  28. Hiderman, R. H., Martin, M., Zimmerman, J. K., Pivorun, E. B. (1991) Identification of a unique membrane receptor for adenosin 5,5- P1,P4-tetraphosphate. J. Biol. Chem. 266: 6915-6918
  29. Hoyle, C. H. V. (1990) Pharmacological activity of adenine dinucleotides in the periphery: possible receptor classes and transmitter function. Gen. Pharmacol. 21: 827-831
  30. Hymel L., Inui M., Fleischer S. and Schindler H. (1988). Purified ryanodine receptor of skeletal muscle sarcoplasmic reticulum forms Ca2+activated oligomeric Ca2+ channels in planar bilayers. Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. 85, 441445.
  31. Kirischuk S.I., Voitenko N.V., Kettenmann H.O. and Verkhratsky A.N. (1994) Mechanisms of cytoplasmic calcium signalling in cerebellar Bergman glial cells // Neurophysiology v.26, 417-419.
  32. Kirischuk, V.Matiash, A.Kulik, N.Voitenko, P.Kostyuk, A.Verkhratsky (1996) Activation of P2-purino, 1-adreno and H1-histamine receptors triggers cytoplasmic calcium signalling in cerebellar Pupkinje neurons // Neuroscience v.73, 643-647
  33. Kostyuk and A. Verhratsky (1994) Calcium stores in neurones and glia //Neuroscience v. 63, N.2, 381-404.
  34. Kostyuk P. G. (1992). Calcium ions in nerve cell function. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University Press.
  35. Kuno M., Maeda N. and Mikoshiba K. (1994) IP3activated Ca2+permeable channels in the incideout patches of cultured cerebellar Purkinje cells. Biochem. Biophys. Res. Comm. 199, 1128 1135.
  36. Lуckhoff A. and Clapham D.E. (1992) Inositol 1,3,4,5tetrakisphosphate activates an endothelial Ca2+permeable channel. Nature 355, 356358.
  37. Londos, C., Cooper, D. M. F., Wolff, J. (1980) Subclasses of external adenosine receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. 77: 2551-2554
  38. Lytton J., Westlin M. and Hanley M. R. (1991). Thapsigargin inhibits the sarcoplasmic or endoplasmic reticulum CaATPase family of calcium pums. Biol. Chem. 266, 1706717071.
  39. Mackgrill J. J. and Lai F. A. (1994). Solubilization of the

Похожие работы

<< < 1 2 3 4 5 6 >